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上海市浦東新区沪南路2419弄30号万科活力城B棟603室
Yanyi Scientific Instruments (Shanghai) Co., Ltd
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BTX製品の中国販売店専門は経典を鋳造する。米国の有名なBTXは専門の細胞融合、電気穿孔器のメーカーである。1983年から、過酷な科学研究者はBTX製品を電気融合、遺伝子組み換えなどの応用分野の*機器としてきた。世界の指導的地位を占める電気融合、遺伝子組み換えシステムのほか、BTXの製品には25種類の関連部品が含まれており、その中には多種の専門電極があり、ユーザーにより多くの選択肢を与えている。BTXはまた技術データベースを構築し、5000部を超える参考目録と600部以上のprotocolsを科学研究に提供している
適用例
•動物細胞トランスフェクション(システム:ECM 630/830)
真核細胞へのトランスフェクションは、リン酸カルシウム沈殿、リポソームトランスフェクション、ウイルス法、電気穿孔などの様々な方法で得ることができる。電気穿孔はすでに正式に伝統的なトランスフェクション方法が効かない細胞に良い効果があるため、zui佳の分子伝達システムに選ばれた。電気穿孔の利点は、再現性、より高い効率、大量のサンプル処理、毒性の無さ、および使用の容易さ(インキュベーション時間を必要としない)である。
Lofinら(1999)は、細胞周期及び細胞分化過程におけるmRNAの遺伝子発現調節、制御を研究するために、NIH/3 T 3細胞に電気穿孔を行った。Bodwellら(1999)は、COS−7細胞の電気穿孔は、長いパルス時間を使用した後に高いレベルの発現を得た。Warnerら(1997)は電気穿孔法を用いてリンパ細胞の形質転換に成功した。Incyte Genomics社はBTX電気穿孔器を用いてES細胞をトランスフェクションして遺伝子組み換えマウスの生産に成功した。BTX ECM 399 \ 630 \ 830型計器、電気穿孔カップ及び多種の特別使用電極は動物細胞トランスフェクション用途に用いられる。
•蛋白質の電気的統合/電気的挿入(システム:ECM 630/830)
細胞にタンパク質を導入し、細胞膜にタンパク質を挿入することも電気穿孔によって実現することができる。ペプチドセグメントだけでなく、抗体を含む複数のタンパク質も導入することができる。Ushio−Fukiら(1998)は、哺乳動物細胞に電気穿孔挿入された外因性タンパク質を定量した。これらの用途には、複数のBTX電極を使用することができる。
•植物細胞変換(システム:ECM 630/830)
植物原形質(トウモロコシ、タバコなど)および完全植物の電気穿孔は、農業/園芸に有用な遺伝子組換え作物を生成するために使用することができる。植物細胞転化の主な目的は、植物細胞を安定的に転化させ、優れた品質と収量の増加を有する作物を生成することである。Linら(1997)は多くの植物におけるGUS発現のための電気穿孔条件を最適化し、その結果、完全な植物細胞及び原形質が有効に転化できることを示した。Diazら(1994)は小麦とオート麦の葉と根の原形質に対して類似の最適化試験を行い、電気穿孔が植物の仕事に対する有効性を証明した。これらの著者らも電気穿孔とPEGの違いを比較した結果、電気穿孔はより効果的で、より再現性があり、より経済的であることが分かった。BTXは世界中の体内転写用特殊電極の者である。これらの用途には、2ピンアレイ、ノギス電極、Tweezertrodesなどの様々なBTX電極を使用することができる。
•壁貼り細胞のトランスフェクション----ACT(システム:ECM 630/830)
通常のサンプルカップに盛られた懸濁細胞に電気穿孔を行うほか、複数の培養プレート上の壁貼り細胞に対してその場電気穿孔を行うことができる。これにより、膵臓酵素による細胞の消化を回避し、細胞の活性及び細胞数の維持に寄与することができる。Lewisら(1999)は、シャーレ電極を用いてヒトおよび静脈内皮細胞に遺伝子をトランスフェクションした。Paptisら(1998)は、導電性スライドに成長したNIH/3 T 3細胞をその場電気穿孔することにより信号伝達を研究した。Teruelら(1999)もまた、スライド上に位置する海馬神経細胞に対してDNA、RNAおよび複数の高分子を転入した。BTXは壁貼り細胞のトランスフェクション(ACT)にPP 35−2、366、747、840及びEpizap電極システムを提供した。これらの用途のために開発された新製品に注目してください。
•高スループットフィルタリング----HTS(システム:ECM 630/830)
高フラックススクリーニング及びcDNAライブラリーの構築には、複数のサンプルを一度に処理する能力が必要である。伝統的なサンプルカップの使用には多大な費用がかかり、時間制限があります。しかし、96ウェルプレートに使用される電極は、これらのタイプの用途に有用であることは間違いない。Hoffma−Tsayら(1994)は96ウェル同軸電極を用いて植物融合実験で8種類の化学物質を検出した。Peterfyら(1995)は多種類の多孔質電極を比較し、DNAをCOS−7細胞に伝達した。Marreroら(1997)は、細胞増殖を誘導するために多孔質電極を用いて血管平滑筋細胞に抗体を電気的に導入した。BTXは現在、747と840をこのような用途に提供し、新しい製品を開発し続けている。
インビボ遺伝子導入(IVGD)(システム:ECM 830)
体内遺伝子転移の非ウイルス技術では、プラスミドDNAを筋肉内に直接注射することは簡単で、安価で安全である。AiharaとMiyazaki(1998)*は、筋肉内でDNA注射と電気穿孔を結合することで、発現を100倍増強できることを指摘した。
Mirら(1999)は、複数の種類の電極を用いて、複数の種類の属の骨格筋(ラット、マウス、ウサギ、サル)に遺伝子を伝達する。彼らの結果は、電気穿孔およびDNA注射を使用することによって、(1)遺伝子移動の効率が大幅に増加したが、発現が2〜4倍増加しただけである、(2)異なる実験間の差が縮小したが、これは単独DNA注射の主な欠点である、(3)発現持続時間が長く(数ヶ月)、これは長期臨床応用にとって非常に重要である、(4)異なる種属の異なる筋肉はすべて陽性反応があり、広範な可用性を説明する、(5)遺伝子発現は非常に特異的で局所的であり、周囲組織は影響を与えなかった。この技術は、肝臓、睾丸、皮膚などの他の組織への使用に成功した。
zui近Vicatら(1999)は、インビボ電気穿孔器を介してマウスの脳組織のような遺伝子を伝達した。強力な脳組織遺伝子転移と呼ばれる非ウイルスベクターのpCMV−lucとPolyEthylenlmineを結合する方法に比べて、電気穿孔の効率は50倍も高い。Nishiらは電気穿孔を用いて有効な神経膠腫遺伝子転移が得られることを証明した。Nishiはまた、実体腫瘍に電気遺伝子治療を行った後、腫瘍の成長が50〜90%阻害されたことを示した。Deanらは遺伝子を完全な腸間膜動脈に電気的に導入することに成功した。電気穿孔は確かに体遺伝子/薬物転移を行うための有望な技術であり、多くの珍しい用途があることが実証されている。BTX社特製の2ピンアレイ電極、Genetrodes、キャリパ電極、Tweezertrodesは、遺伝子の侵入性および侵入性を組織に移す方法を提供する。
卵内遺伝子移動(IOGD)(システム:ECM 830)
Muramatsuら(1997)は3つのトランスフェクション方法を比較し、外因性遺伝子を早期鶏胚に転入して発現させた。リポソームトランスフェクションや遺伝子銃に比べて、電気穿孔はzuiの有効な方法であることを発見した。Takeuchiら(1999)は電気穿孔技術を用いて早期鶏胚をtbx 5およびtbx 4遺伝子にトランスフェクションし、肢芽の翼/脚マーカーを決定した。
この用途に特化した電極が開発されている。卵胚及び標的組織の特定領域を測定するために用いられるGenetrodes、L形状針電極。多くの研究者はすでに目、心または肢体組織を転写し、発育生物学的方法のさらなる研究を容易にした。発売されたばかりの足制御スイッチは遠隔制御機能を持ち、ECM 830が手操作を必要とせずに活性化できることであり、これは卵内、体内、体外胚用途にとって非常に重要である。
invitro胚遺伝子転移(IVEGD)(システム:ECM 830)
タサキら(1999)は、インビトロマウス胚への電気穿孔の使用について議論した。マウス胚には柱状の構造があり、家禽よりも胚培地の操作需要が多い。胚を異位発現研究のために電気穿孔する可能性がある。マウスにおける後頭部の遺伝子発現が観察された。この技術は交尾後9.5日のマウス胚にも用いられ、神経分化におけるHu遺伝子の機能を研究した。BTXは、これらの目的のために新しい電極:Genepaddlesを提供します。
•胚操作/核移植/動物クローン(システム:ECM 2001/830)
核移植は細胞核をドナーから受容体に転入する過程である。細胞核は胚の発育を指導し、新生体が安全に生まれるようにする。この過程で、電気融合はドナー細胞と受容体卵細胞を融合させ、さらに細胞分裂を活性化させ、胚を形成するために用いられる。Mengら(1997)は核移植技術を霊長類動物モデルに拡張し、ガンジス川猿をクローンした。技術の進歩により、研究者は分裂球からより高分化した胚細胞及び静止した胚細胞まで核の供給源として進行することができる。胚産生細胞を6〜13世代インビトロで培養し、転入前に血清飢餓法を用いて細胞を静止させた。前述したように、Roble、Cibelli、Sticeは、1998年に非老化胚線維芽細胞を核のドナーとして核移植してヒツジクローン遺伝子組み換え牛を産生することを報告した人である。Ian Wilmutは1996年に全世界を驚かせ、成人乳腺の細胞から動物のクローンであるドリーを生み出した。分化した成年細胞を用いたクローン作成能力は、核移植の広範な応用の扉である遺伝子治療のエキサイティングなモデルを開いた。zui社の成功事例PPL Therapeutics社は成体細胞から豚をクローンした。これらの用途には、様々な細胞融合試料プール及びマイクロスライドを使用することができる。
技術仕様
動作状態:POST機能がある
インタフェースインタフェース:デジタルユーザインタフェース
入力電圧:110 VAC/220 Hz
充電時間:zui長さ5秒(遅延なし)
電圧範囲:5-500 V低圧動作モード連続調整可能/毎回1 V調整可能
20-3000 V高圧動作モード/毎回5 V調整
パルス幅選択:10μs-999μs低圧動作モード/1μs精度
1 ms-999 ms高圧動作モード/1 ms精度
1 s-10 s低圧動作モード/0.1 s精度
10μs-600μs高圧動作モード/1μs精度
パルス個数:1-99
パルス間隔:100 ms-10 s
安全性:短絡防止保護設計
その他の指標:電気容量:4000μF
電気流量:10μs 500 A
物理パラメータ:サイズ:12.5'×12.25'×5.5'(W×D×H)
重量:15ポンド(6.8 kg)
表示:20×4ビットLCD液晶ディスプレイ
コントローラコントローラ:回転式電圧選択ボタン
押圧式電源スイッチ及びピンポントリガスイッチ
シリアルインタフェース:RS 232とRS 485
モニタ:表示電圧(V)時間(t)パルス数(n)をモニタできる